多房棘球蚴感染对小鼠肝脾淋巴细胞及其亚群的影响

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量多房棘球蚴原头节的混悬液,采用门静脉注射法建立多房棘球蚴感染小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,每组各取4只小鼠,取肝脏组织,常规Masson染色,观察病理变化。剩余4只小鼠取肝脏和脾脏,制备肝、脾细胞悬液,流式细胞术检测肝、脾CD3~+T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD4~+CD69~+T细胞、CD8~+CD69~+T细胞绝对数以及初始型CD4~+T (CD4~+Tn)细胞、效应记忆性CD4~+T (CD4~+Tem)细胞、初始型CD8~+T (CD8~+Tn)细胞、效应记忆性CD8~+T(CD8~+Tem)细胞和中心记忆性CD8~+T(CD8~+Tcm)细胞比例的变化。检测数据采用Flow-Jo软件分析,并做流式图。采用Graphad Prism 7.0软件进行作图和统计学分析。结果感染后4周,对照组小鼠肝无明显变化,低、中数量组小鼠肝组织出现急性炎症反应减弱,部分病灶炎性反应逐渐转变为纤维化修复,形成小肉芽肿结节,呈点状或灶状坏死。高数量组小鼠肝内出现小囊泡,可见生发层结构,周围大量炎性细胞浸润。小鼠肝CD3~+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(4.10±0.04)×10~5、(3.81±0.14)×10~5、(3.02±0.12)×10~5、(2.98±0.03)×10~5,高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠脾CD3~+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(16.01±0.40)×10~5、(11.03±1.21)×10~5、(10.10±1.01)×10~5、(9.71±0.90)×10~5,高数量组高于其他3组(P<0.01)。小鼠肝CD4~+T、CD8~+T细胞和脾B细胞、CD8~+T绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4~+CD69~+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(3.23±0.10)×10~4、(1.98±0.11)×10~4、(1.51±0.26)×10~4、(1.19±0.21)×10~4,高数量组高于其他组(P<0.05)。小鼠脾CD4~+CD69~+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(10.10±0.41)×10~4、(8.91±0.80)×10~4、(8.20±0.41)×10~4、(6.81±0.50)×10~4,高数量组高于对照组(P<0.01)。肝、脾CD8~+CD69~+T细胞绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4~+Tn细胞比例高、中、低数量组和对照组分别为(15.52±1.51)%、(19.3±2.09)%、(20.66±1.28)%、(23.62±2.84)%,对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8~+Tn细胞比例对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8~+Tcm细胞比例高数量组高于对照组(P<0.05)。结论高数量多房棘球蚴感染C57BL/6小鼠,肝区域以CD4~+T细胞和CD8~+T细胞募集为主,而脾以B细胞和CD8~+T细胞募集为主。

【关键词】 多房棘球蚴 T淋巴细胞 早期 流式细胞术

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